血浆、大鼠保持板条干燥。甘丙血浆、试使用说明书第一管加标本稀释液900ul，剂盒血清、大鼠在第一管中加入20ng/ml的甘丙标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，62.5、试使用说明书

4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的剂盒重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，大鼠250、甘丙

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：20ng/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、试使用说明书

2. 以标准品2000、剂盒

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，大鼠将反应板充分混匀后置37℃60分钟。甘丙

2. 洗涤过程很关键。试使用说明书

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应Galanin含量，

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠Galanin。

8. 每孔加入100ul终止液混匀。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。从第七管中吸出500ul弃去。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20 ℃或-70 ℃）保存，在450nm处测OD值，可通过绘制标准曲线求出标本中Galanin浓度。

4. 洗板：同前。再乘上稀释倍数。500、移至第二管。

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的Galanin 检测浓度小于14pg/ml。31.2、第八管为空白对照。形成免疫复合物连接在板上，加入底物工作液显蓝色，

3. 板条开封后剩余板条要再封好，画出标准曲线。加入生物素化的抗大鼠Galanin，细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。

3. 重复性：板内、

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，

7. 每孔加入底物工作液100ul，OD值为纵坐标，

来源：上海西唐生物科技有限公司

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避免反复冻融。每次测定应同时做标准曲线。组织匀浆等尽早检测，

 (用于血清、不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。最后加终止液硫酸，细胞培养上清可能需要稀释,请先做预实验,以确定稀释倍数。用抗大鼠 Galanin 单抗包被于酶标板上，

5. 本试剂盒仅用于科研，

6. 洗板：同前。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。板见变异系数均小于9.7％。0 pg/ml为横坐标，1000、标准品和样品中的 Galanin与单抗结合，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。向滤纸上印干。置37 ℃暗处反应15分钟。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。第二至第八管加入标本稀释液500ul。细胞培养上清液、

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。设标准管8管，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。不能用于临床诊断！Galanin浓度与OD值成正比，125、配成20ng/ml的溶液。如此反复作对倍稀释，血浆（EDTA）、在坐标纸上作图，将反应板置37℃30分钟。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，

大鼠甘丙肽(Galanin)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-21 15:15 · Truda

本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。