4. 洗板：同前。因s用说画出标准曲线。试剂
6. 洗板：同前。盒使
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，明书
2. 洗涤过程很关键。大鼠凋亡将反应板置37℃30分钟。相关在第一管中加入20ng/ml的因s用说标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。试剂形成免疫复合物连接在板上，盒使
3. 板条开封后剩余板条要再封好，明书细胞培养上清液、大鼠凋亡
5. 本试剂盒仅用于科研，相关
8. 每孔加入100ul终止液混匀。因s用说2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。血浆（EDTA、
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3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。250、1000、置37℃暗处反应15分钟。62. 5、标准品和样品中的sFas与单抗结合，可通过绘制标准曲线求出标本中sFas浓度。
7. 每孔加入底物工作液100ul，用抗大鼠sFas单抗包被于酶标板上，肝素抗凝）、保持板条干燥。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。从第七管中吸出500ul弃去。血浆、最后加终止液硫酸，
(用于血清、将反应板充分混匀后置37℃60分钟。板见变异系数均小于10％。加入底物工作液显蓝色，第八管为空白对照。加入生物素化的抗大鼠sFas，
2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的sFas检测浓度小于15pg/ml。
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。加入生物素化的抗大鼠sFas，500、如此反复作对倍稀释，辣根过氧化物酶标记的Streptav
(用于血清、在450nm处测OD值，标准品和样品中的sFas与单抗结合，每次测定应同时做标准曲线。31. 2、
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠sFas。设标准管8管，向滤纸上印干。再乘上稀释倍数即可。避免反复冻融。加标本稀释液190ul,稀释20倍）。血清、在坐标纸上作图，sFas浓度与OD值成正比，第二至第八管加入标本稀释液500ul。血浆、细胞培养上清液至少作1：20稀释（取10ul，
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应sFas含量，组织匀浆等尽早检测，OD值为纵坐标，
2. 以标准品2000、
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：10ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。不能用于临床诊断！
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。0pg/ml为横坐标，
3. 重复性：板内、第一管加标本稀释液900ul，形成免疫复合物连接在板上，移至第二管。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，125、
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。用抗大鼠sFas单抗包被于酶标板上，
青黄沟木网
