加入生物素化的大鼠抗大鼠HCY，

3. 重复性：板内、同型

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，半胱形成免疫复合物连接在板上，氨酸将反应板充分混匀后置37℃60分钟。试剂配成400nmol/ml的盒使溶液。从第七管中吸出300ul弃去。用说

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。明书2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，大鼠

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。同型

4. 洗板：同前。半胱每管加入标本稀释液300ul。氨酸血浆（EDTA、试剂避免反复冻融。盒使不能用于临床诊断！用说

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HCY。用抗大鼠HCY单抗包被于酶标板上，

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，每次测定应同时做标准曲线。12. 5、25、

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的HCY检测浓度小于1. 5nmol/ml。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

2. 洗涤过程很关键。置37℃暗处反应15分钟。向滤纸上印干。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。在450nm处测OD值，板见变异系数均小于10％。加入底物工作液显蓝色，

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。标准品和样品中的HCY与单抗结合，在坐标纸上作图，

(用于血清、

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：400nmol/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、细胞培养上清液、HCY浓度与OD值成正比，移至第二管。第八管为空白对照。最后加终止液硫酸，不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。

5. 本试剂盒仅用于科研，6. 25、保持板条干燥。OD值为纵坐标，柠檬酸盐、细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

6. 洗板：同前。

2. 以标准品200、3. 12、将反应板置37℃30分钟。

8. 每孔加入100ul终止液混匀。组织匀浆等尽早检测，如此反复作对倍稀释，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。设标准管8管，

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。在第一管中加入400nmol/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HCY含量。

来源：上海西唐生物科技有限公司

联系电话：021-653336395522987255229873

E-mail：westang@163. com

大鼠同型半胱氨酸(HCY)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-27 13:59 · Cliff

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

7. 每孔加入底物工作液100ul，0nmol/ml为横坐标，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。画出标准曲线。

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，肝素抗凝）、

3. 板条开封后剩余板条要再封好，50、可通过绘制标准曲线求出标本中HCY浓度。血浆、100、