|
0pg/ml为横坐标，大鼠在坐标纸上作图，肝细 2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，胞生第八管为空白对照。长因 
7. 每孔加入底物工作液100ul，试剂 
(用于血清、盒使250、用说每次测定应同时做标准曲线。明书 
2. 以标准品8000、大鼠 试剂盒组成（2-8℃保存） | 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml | | 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml | | 标准品（Standards）：8ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml | | 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样 1. 收集标本：血清、肝细 2. 洗涤过程很关键。胞生洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。长因柠檬酸盐、试剂配成16000pg/ml的盒使溶液。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，用说辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合， 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。移至第二管。血浆（EDTA、 2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HGF。细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。最后加终止液硫酸，向滤纸上印干。 4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水） 检测程序 1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul， 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。 4. 洗板：同前。肝素抗凝）、OD值为纵坐标， 5. 本试剂盒仅用于科研，用抗大鼠HGF单抗包被于酶标板上， 3. 重复性：板内、避免反复冻融。500、2000、 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。在450nm处测OD值，可通过绘制标准曲线求出标本中HGF浓度。板见变异系数均小于10％。加入底物工作液显蓝色，将反应板置37℃30分钟。血浆、HGF浓度与OD值成正比，4000、 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，不能用于临床诊断！加入生物素化的抗大鼠HGF，每管加入标本稀释液300ul。如此反复作对倍稀释，保持板条干燥。 3. 板条开封后剩余板条要再封好，将反应板充分混匀后置37℃60分钟。标准品和样品中的HGF与单抗结合，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。从第七管中吸出300ul弃去。 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。在第一管中加入16000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，125、 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。画出标准曲线。 来源：上海西唐生物科技有限公司 联系电话：021-653336395522987255229873 E-mail：westang@163. com 大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒使用说明书 2011-07-28 12:45 · Chad 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。 2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，设标准管8管， 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HGF含量。1000、 6. 洗板：同前。形成免疫复合物连接在板上，置37℃暗处反应15分钟。 8. 每孔加入100ul终止液混匀。 试剂盒性能 1. 灵敏度：最小的HGF检测浓度小于60pg/ml。 | 
喜欢
讨厌